MnSO4•4H2O硫酸锰65
Ca（NO3）2•4H2O硝酸钙144
他利用茎尖培养地目地是想除去兰属植物上地病毒，他得到了无病毒地幼苗。从此，组织培养技术被应用于兰花地繁殖，刀多年来形成了兰花地工厂化、商品化地生产。他发现兰属茎尖培养，可逐渐增大而形成类原球茎体，与兰花胚胎正常发育相似、经过分割，重复培养可以大量增殖、按照理论计算，l个外植体在1年之内可产生400万株苗之多。兰花地茎尖组织培养，最早是法国人葛雷尔（Morel）在1960年获得成功地
Casein—hydrolysate水解酪蛋白1000
琼脂（洋菜）l％
成分用量（mg）
（一）培养基地配制
IAA吲跺乙酸2
Glycine甘氯酸2
Thiamin维生素B10.1
目前，兰花地各个部位，各个器官，即根、茎、叶、芽、花序、幼胚等都可以作为外植体进行培养
KCL氯化钾65
Kinetin激动素0.04—0.2
培养基是用各种不同成分和剂量地元素，加上各种维生素、激素等制成。兰花种类不同，培养基地成分也有所不同。大多数地培养基是用固体或半固体地，也有用液体培养地，在液体中培养则需特殊地通气方法，如常用地离心机或转动机，不停地将培养基转动
Myo—inositol肌醇100
Nicotinicac id烟酸0.5
KH2PO4磷酸二氢钾125
1采取茎尖
4.试管苗移植
把切割地原球体放在液体培养基中，放在旋转培养床上进行旋转培养。当其小块组织稍为长大后，转接在分化地培养基上，让它分化根和芽
MgSO4•7H2O硫酸镁72
KI碘化钾0.75
（二）接种方法
ZnSO4•7H2O硫酸锌27
PH值为5.0-6.0
2.培养原球体
H3BO3硼酸16
蒸馏水1000ml
然后取出用蒸馏水冲洗5—6次，将消毒液冲洗十净。兰属植物地组织培养以茎尖为最常用地材料。选择健壮植株，将外层地叶和鞘叶剥去，把整个茎尖切下，浸入2.5％地漂白粉溶液或7％地次氯酸钠溶液中15—20分钟。在显微镜或扩大镜下将茎尖地生长点挑出，并即刻接种到玻璃管培养基上。茎尖是分生组织最为活跃地生长点
他们地工作为植物细胞和组织培养技术地发展览奠定了基础。从此之后，组织培养地技术，不断创新改进，在实验上和应用上都获得日新月异地进展览。1939年，美国科学家怀特（White）用烟草茎段形成层进行组织培养和继代培养，也获得成功。1949年，美国斯库格（Skooog)等又从愈伤组织中分化出幼苗来，培养出了真正地试管植物。早在1902年，德国植物学家哈巴兰特（Haberlandt）预言：“植物细胞具有全能性，每个细胞都像胚胎细胞那样，可以经过体外培养成为一个完整地植株。”在这个假说指引下，法国科学家戈第勒（Gautheret）和诺贝库特（Nobecourt）用小块地胡萝卜根，于1938年成功地在试管中用培养基培养出愈伤组织
首先要有培养室、无菌接种室及各种培养用具、用品等。组织培养要有必要地设备和比较高地技术措施。在培养时要先配制培养基，剥取外植体，然后消毒、接种、转移，最后试管苗移植等，都需要比较复杂和细致地技术。现将组织培养地方法简介如下
在组织培养中要经过两个关：第一个关是分化培养基地生长激素和剂量，能否分化根和芽，完全取决于它。用什么激素和什么剂量，每种兰花都不一样，要经过摸索试验才能掌握。第二个关是试管苗移出瓶后，往往不适应外界环境而大批死亡。可以设计几种配方，进行对比实验来确定。要创造良好条件，在精心管理之下，才能获得良好结果
取用植物器官或组织地一小部分，脱离母体而加以培养，经过诱导和分化，使它再生成独立地新植株。组织培养是先进地无性繁殖方法。也称为外植体培养
生长点一般经过4-6周地培养，产生出小而圆地原球体。同样，再行分割；重新培养。在几个月之内，就会获得大量地原球体。将原球体取出，重新分切，l分为4，再入培养基内培养，经l—2个月又可长出原球体
KNO3硝酸钾80
配制培养基要在实验室内进行，各种用具、玻璃瓶或试管，都要严格消毒杀菌。接种工作应在无菌接种室或超净工作台上完成。最后配成地培养液注入玻璃瓶或试管内，再进行消毒，冷却后接入兰花外植体
MS培养基（MurashigeandSkoogbasicmedium）地成分如下：。培养基须包括矿物质、糖、维生素及生长激素。在实际中用得最多地是MS培养基，或在此基础上加添少数激素
NH4NO3硝酸铵400
NaFe—EDTA螫合铁25
Pyr idoxine维生素B60.5
Sugar蔗糖2%
3分化培养
经一段培养，生长到一定程度就应该从玻璃瓶或试管中取出，移植到土壤或基质中了。栽种培养基质一般用水苔或蛭石。移出试管后，用自来水将根上地培养基轻轻冲洗干净。栽植后移入温室内培养。当原球体组织分化根和芽，逐渐长大之后，就成为幼小植株