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怎样通过茎尖培养法获得果树无病毒母本树?

然后在1.1千克/平方厘米下消毒15分钟,备用。(4)诱导生根与移植:增殖繁殖得到的芽或新梢,移置到生根培养基中,经诱导生根培养,便可以得到完整的试管苗。用部分灭菌水将各种化合物溶解,然后加入琼脂,加热溶化,最后以灭菌水定容,调节PH值,倒入培养器皿中。怎样通过茎尖培养法获得果树无病毒母本树?病毒侵入果树后,一般是全身扩展,但茎尖一般不受病毒感染。生根培养基采用1/2MS+IAA1.5PPM+蔗糖20G/L、琼脂5~7.5G/L,PH值5.8。(5)病毒检测:茎尖培养获得的个体长成后同样要进行严格的病毒检测,确认无毒者,作为无病毒原原种母本树保存和利用,带毒者淘汰。把芽鳞片剥除,切下茎尖长0.1~0.2毫米。增殖系数一般为每30~40天达1:4~1:6。(3)培养及增殖:把0.1~0.2毫米的茎尖接种于培养基上,在温度28~30度、光强1500~2000勒克斯、光照每天10小时左右的条件下培养。待根长2~3厘米时,敞开培养器皿口,驯化2~3天后,切下带根小苗,洗去培养基,移植于腐殖土与砂(1:1)混合的基质中,最后移植到大田中。因为,切下带有1~2个叶原基的茎尖进行培养,便可获得无毒个体。以苹果为例,介绍具体步骤如下:(1)培养基配制:苹果茎尖接种培养基和繁殖培养基采用MS+GA30.1~0.5PPM+IBA(或IAA)0.2~0.5PPM+BA0.5~1.0PPM+蔗糖30G/L+琼脂5~7.5G/L,PH值5.8。为了增殖,在无菌条件下切取茎尖产生的侧芽,接种到增殖培养基上。梨、葡萄和核果类果树与苹果茎尖培养的不同之处,是培养基的配方不同。(2)切取茎尖:于春、夏取田间嫩梢,用70%酒精消毒30秒,再用10%漂白粉或0.1%升汞液消毒10~15分钟,灭菌水冲洗3~5次

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