称取供试品0.5g,共6份,精密称定后,按拟定的方法试验,测定含量,平均含量为3.15%,RSD=0.195%(n=6)
标准曲线见图2。精密吸取对照品溶液(60.2μg/mL)2,4,8,12,16μL分别注入液相色谱仪,以绿原酸对照品的量为因变量(Y),以绿原酸峰面积为自变量(X),计算回归方程为:Y=3182.95x-33.08,r=0.9999(n=5)。结果表明绿原酸在0.12～0.96μg范围内呈良好线性关系
2.7重复性实验
称取已知含量的供试品约0.025g,精密称定后,加入绿原酸对照品溶液10mL,按样品提取测定方法测定,测得平均回收率=99.80%,RSD=1.17%(n=6),结果见表1
样品色谱图见图1。Zorbax-C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(15∶85),流速1.2mL/min,检测波长327nm,柱温30℃
中图分类号:R285文献标识码:A
取金银花粉末(过40目)0.5g,精密称定,加70%乙醇约100 mL,密塞,浸渍0.5h,超声提取40min(功率250W,频率35kHz),取出,冷却,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,静止,上清液用0.45μm滤膜滤过即可
2.1色谱条件
2.3.2水蒸气蒸馏提取[6]
关键词:金银花;绿原酸;RP-HPLC
精密称取五氧化二磷真空干燥24h的绿原酸对照品6.02mg,置100mL棕色量瓶中,加50%甲醇至刻度,摇匀,制成每1mL含60.2μg的对照品溶液
文章编号:1673-7717(2007)04-0820-03
2.3.3超声提取[4]
2.2对照品溶液的制备 [3]
2.3.1乙醇回流提取[4]
Agilent1100系列高效液相色谱仪(美国),超声清洗机(上海超声仪器厂),格兰士微波炉(广东格兰士集团有限公司),电热套(北京永光明医疗仪器厂)
在上述色谱条件下,精密吸取同一份供试品溶液5μL,测定,计算含量, RSD=1.62%(n=6),结果表明绿原酸在避光条件下放置,24h内基本稳定
2.3.4微波提取[7]
表1加样回收率试验结果
2.4标准曲线的制备
样品重(g)绿原酸含量(%)样品绿原酸含量(mg)加样量(mg)实测值(mg)回收率(%)平均值(%)RSD(%)
结果:微波和超声提取金银花,绿原酸含量最高,且无明显差异。结论:微波和超声提取方法提取效率高,并且简单、稳定、可行。摘要:目的:考察不同提取方法对金银花中绿原酸含量测定结果的影响。方法:应用乙醇回流、水蒸气蒸馏,超声、微波等方法提取金银花,采用高效液相色谱法测定金银花中绿原酸的含量
2.3供试品溶液的制备
2方法与结果
在上述色谱条件下,精密吸取同一浓度的对照品溶液5μL,连续进样6针,计算,RSD=0.87%
1仪器与试药
本文以金银花主要化学成分绿原酸为考察指标,通过对金银花不同提取方法的比较,了解绿原酸在提取物中的含量及提取物总收率,以确定金银花的提取方法。主要有效成分有以下几类:①挥发油:具有抑菌抗病毒的作用;②木犀草素:具有抗菌、消炎、改善心血管功能及解痉,祛痰,抗癌的作用;③酚酸类物质:绿原酸、异绿原酸具有广谱抗菌及抗氧化的作用。研究者大多认为,绿原酸,异绿原酸和木犀草素等为已知有效成分,可作为药材质量首先考查的指标。由于金银花挥发油量较低,成分复杂,且鲜花与干花之间主要有效成分有明显的不同,因此金银花以挥发油作为金银花质量标准物质,在实际操作过程中,有一定困难,因此未列为主要研究内容。据金银花所含化学成分有绿原酸,异绿原酸,黄酮化合物,芳樟醇和双花醇等[2]。具有清热解毒,凉散风热的作用[1] ,系最常用的中药之一。金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonicaThunb,红腺忍冬Lonicera hypoglauca Miq,山银花Lonicera Confusa DC,或毛花柱忍冬Lonicera dasystyla Rehd的干燥花蕾或带初开的花
取金银花粉末(过40目)0.5g,精密称定,加入20倍水,密塞,浸渍0.5h,水蒸气蒸馏提取1h,滤过;残渣同上法操作,合并两次滤液于100mL量瓶中,冷却,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,静止,上清液用0.45μm滤膜滤过即可
2.6稳定性试验
2.9样品含量测定
2.8加样回收率试验
取金银花粉末(过40目)0.5g,精密称定,加70%乙醇约100 mL,密塞,浸渍0.5h,微波提取1min(低火),取出,冷却,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,静止,上清液用0.45μm滤膜滤过即可
2.5精密度试验
取金银花粉末(过40目)0.5g,精密称定,加入20倍70%乙醇,密塞,浸渍0.5h,乙醇回流提取1h,滤过;残渣同上法操作,合并两次滤液于100 mL量瓶中,冷却,用70%乙醇定容至刻度,摇匀,静止,上清液用0.45μm滤膜滤过即可
不同提取方法对金银花中绿原酸含量测定的影响
金银花(购于武昌刘有余饮片厂,经本校生药教研室鉴定为正品),绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所),用于提取和分析的试剂均为分析纯,水为蒸馏水
史克莉 许蜡英