①苗的取出先在瓶中注入清水,用摄子轻轻地将培养基块搅碎,这样可避免根受伤以及因培养基带入土中引起的腐烂
3、接种从灭过菌的芽中剥取茎尖或生长点,或将根茎、幼茎、下胚轴等切成0.5-1厘米长的切段,或将叶片、花瓣、子叶等切成0.5-1厘米2的切块。在无菌室内或超净工作台接种到培养基上
2、材料表面灭菌先用肥皂水洗涤材料,然后用自来水冲洗,再放入70%的酒精中约30秒钟,取出后在0.1%的升汞中浸泡5-10分钟或在10%的漂白粉上清液浸泡10-15分钟,最后用蒸馏水冲洗3次
分生繁殖又可分为分株和分球两种。分生繁殖方法简单,成活率高,成苗快,但产苗量较低。前者多用于萌蘖性强的多年生草花和丛生性强的花灌木,后者多用于球茎、鳞茎类的花卉。(三)分生繁殖对于易丛生、易萌蘖及球根类的花卉通过分株或分球进行分离栽植的繁殖方法统称分生繁殖
分株法繁殖的植株多数能在当年开花。分株的方法简单,如牡丹、腊梅等丛生型的花木,掘起植株酌量分丛;蔷薇、凌霄、金银花等则从母株旁分割带根枝条即可;大丽花、美人蕉等将块根带芽分离,或用刀将根状茎及芽或根状茎及地上部分一起分割后种植;兰花、君子兰,只要在翻盆时分成2~3丛另行栽植即可
(2)移栽
(2)芽的增殖此阶段的培养目的是繁殖大量有效的芽和苗。在芽增殖的培养基上,细胞分裂素是不可缺少的。芽的增殖速度是离体快速繁殖中最为重要的一个问题。生长素多用萘乙酸,但浓度不可过高,否则对芽的增殖反而起抑制作用,并容易形成愈伤组织。而且以6-苄基腺嘌呤对芽的大量增殖最为有效。有时加入低浓度的赤霉素以促进芽的伸长
2、分球法分球法是将鳞茎、球茎、块茎及根茎自然分离
植物组织培养是指将植物的离体组织部分(器官、组织和细胞)在适宜的人工培养基上进行无菌培养,使其增殖(产生愈伤组织)并逐步分化出器官(芽和根)和形成小植株的方法
③把茎基在100-1000pp米的吲哚丁酸溶液中浸一下,再移至生长素培养基中培养
4、培养
波状压条多用于枝条长而柔软的蔓性花木,一般于春夏,将长枝弯曲成波状,向下屈的各个部分刻伤、固定、埋土,次年春季生根抽枝后切离分栽
秋植的初夏掘起并分离子鳞茎,经休眠于秋季种植,故又称秋植球根,需几年的培养,一般要培养到球茎达5~7厘米时才能开花,如水仙。春植的深秋掘起并分离子球,贮藏过冬,来春种植,故又称春植球根。大球当年能开花,小球需2~3年才能开花,如唐菖蒲
(1)炼苗为保证移栽后成活,使试管苗适应从异养型转变为自养型的过程,因此需要炼苗。在移栽前一天打开瓶塞,第二天再移苗。其步骤:把培养物放置在移栽环境中3-10天,使其适应新的光、温、湿条件
沙培2-3周之后则可移栽到装有土壤的花盆和木箱中培养成栽培用苗。②种植先将生根苗移栽到洗净灭菌的河沙中进行沙培。初期应注意保持移栽苗环境中有较高的湿度和较稳定的气温(22-25℃)
1、分株法不论是分离母本根际的萌蘖,还是将成丛花卉分劈成数丛,分出的植株必须是具根、茎、叶的完整植株
(1)初次培养外植体在组织培养的初期,首先是产生愈伤组织,再分化出芽或直接产生芽,形成带根植株。在初次培养所用的激素中,细胞分裂素以6-苄基腺嘌呤效果最好,生长素以加萘乙酸效果为好
三、快速繁殖
4、嫁接后的管理
当今,用试管繁殖的建兰、蝴蝶兰、石斛兰、香石竹、月季、西洋杜鹃、菊花、非洲菊、球根海棠、天竺葵、百合、凤信子、中国水仙、唐菖蒲、鸢尾、萱草等30多种花卉,已进入商品领域。花卉的快速繁殖又叫试管繁殖,是指用组织培养方法快速无性繁殖花卉的一种新技术。据不完全统计,已的花卉试管苗约有67个科,370余种,其中兰科约占150种
根据病毒在植物体内分布不均匀的理论,组织培养的材料如果是茎尖分生组织,那么,得到的苗基本上是不带病毒的。如菊花、香石竹等。表现为生长迟缓、花径变小、花色退化,大大地影响了观赏价值。因此,随着栽培时间的推移,其危害日趋严重。因此,应用茎尖培养技术可繁殖和保存无病毒的栽培品种,或者从感染病毒的植株重新获得无病毒植株,提高花卉的品质和产量。2、培养无病毒苗大多数木本观赏植物只进行无性繁殖,但由于病毒会通过繁殖器官如枝条、块根、块茎、鳞茎、球茎等进行传递,在母株内逐代积累
(一)植物组织培养的基本原理及用途
②在培养基中添加0.1-1pp米萘乙酸或吲哚丁酸
因此这些花卉不能用种子繁殖。采用组织培养繁殖法不仅可以得到遗传基础一致的苗木,而且还大大地提高了繁殖率,如多倍体萱草。而传统的无性繁殖虽然提供了遗传基础一致的苗木,但通常会受到数量的限制,且很多种类扦插生根较难。3、用于三倍体、多倍体、杂种F1代的繁殖在自然条件下,三倍体、多倍体花卉表现高度不育,杂种F1代如果用种子繁殖,则F2代性状发生分离,品质变劣
1、培养材料的选择为了获得无病毒植株,最好选用茎尖、生长点、形成层等作为外植体。此外,还可选用叶片、鳞茎、茎段、花瓣、子房、珠心、子叶、下胚轴等
单枝压条多用于丛生灌木,一般晚秋或早春将近地面一二年生枝条的下部刻伤弯曲埋入土中,枝顶露出地面,固定后覆土压紧
在正常情况下,接后3周至1个月即可松绑,一般待接穗上新芽长至2~3厘米时即可全部解绑。对于嫩枝接等套塑料袋者,要注意先松开透气,逐渐去袋,不可冒然一次除去,让新芽有锻炼机会。新芽长到一定程度时,要设立支柱,以防风折。一般芽接后10天左右,用手触动接芽的叶柄,如很易脱落,即证明初步成活,如接穗干缩,芽枯黑者为未接活,可将土堆全部扒除,使砧木萌蘖,至夏、秋或明春再补接。成活后,砧木上常萌发许多蘖芽,要及时予以剪除,以免与接穗争夺水分
一般于春夏,长江中下游地区多于梅雨季节,选老熟健壮、叶芽饱满的枝条进行环剥,然后用塑料薄膜、竹筒、花盆或其他容器,内填苔藓或培养土等基质,套好并固定,以后经常注意浇水以保持基质湿润,秋季生根后即可剪离。2、高枝压条多用于枝条较硬不易弯曲,又不易发生萌条的种类
1、普通压条将接近地面的丛生枝、萌枝进行压条的方法统称为普通压条法。它包括单枝压条、堆土压条、波状压条等
采用White生根培养基或稀释2-10倍的米S培养基。①降低培养基的盐浓度
分球繁殖的时间为春季或秋季,如球茎类的唐菖蒲为春季,鳞茎类的百合、水仙、郁金香等则为秋季
5、炼苗与移栽
一般10米米长的芽即可转入生根培养基。大多数植物只需将无根苗移至无生长素的米S培养基或稀释的一倍的米S培养基上便可长根。但对一些较难生根的植物,可采用下列方法:。(3)生根培养其培养目的是使第一和第二阶段培养的苗发生不定根,并使苗继续长大,从而长成完整的小植株
(二)花卉组织培养繁殖的方法
一般于春季在枝基部刻伤或环剥后覆土,使枝条基部生根后于晚秋分离。堆土压条法多用于丛生性强的直立性花灌木
对于温室中的吊兰等常从走茎上产出小植株的植物,可随时分离栽植。对于草本花卉,如兰花、丽花、美人蕉、鸢尾等多在春季。对于木本花卉,如腊梅、牡丹、迎春等,在温暖地区可在秋季。分株繁殖的时间多在早春或秋季
球茎分离后必须将大球和小球分开、分级,并置于冷凉通风处贮藏,经休眠后分别栽植
此法可以使优良品种在短期内得到普遍推广。例如兰花试管苗繁殖1年可增殖106株。1、用于优良品种的快速繁殖组织培养可以在人工控制的条件下,利用少量的母株,显著提高繁殖系数
但生根时间较长,局限于丛生、匍匐性、蔓性花木,繁殖量小。(四)压条繁殖将母株接近地面的部分枝条压入土内,使之生根后再断离母株,成为独立的新植株的繁殖方法