此时根系也可达至5厘米左右，此时温度应降些，防止陡长，温度应控制在18℃，可以适当增加光照，在苗期不宜使用矮壮素。在植株长至3－4片真叶时，可进行适当的炼苗，促使植株健壮。土壤ph值应在5.8－6.2为适宜，如大于6.5会出现根系发黑，基叶发黄。选用排水良好的培养土，这对生长在冷凉、弱光的秋冬季尤为重要，否则不易干燥而严重影响生长。当根系已形成根球，穴盘苗可以直接上盆，常采用小盆，盆径为10cm
三色堇学名violatricolor（英文名pansy）原产南欧，别名猫脸，是堇菜科多年生草本植物。三色堇喜凉爽气候，可秋季播种，应用于春季花坛，也可夏季播种，晚秋开花
三色堇小苗成长阶段土壤温度为15－24℃，温度越低植株生长越慢，植株越健壮。土壤ph值保持在5.5－5.8，交替施用一些n肥或硝酸钾肥。三色堇播后可用蛭石覆盖种子，土温18－24℃，保持介质湿润，胚根长出前不需要光照，一般7－14天可出苗。浇水前让土壤干透但要避免植株永久性萎焉，这有利于三色堇根的生长
三色堇发芽适温为18－21℃，避光条件下7－10天发芽，生长适温为10－13℃，播种后14－15周开花，播种时如气温太高，会严重影响种子的发芽和幼苗的生长，导致成苗率过低。通常可采用两种方法降温：一是采用发芽室或人工降温，制造适宜的发芽温度和湿度，出苗后移至有温帘降温的，遮阳通风条件好的育苗棚内，让幼苗正常生长，二是利用高山，在长江流域需海拔700米以上自然低温的气候条件下进行高山育苗