│││││养│
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││││在滤纸上发芽││
1、取材植物体的各个部位皆可培表,但根据需要培养的难易,对不同植物则有所区别。茎尖是利用最多的部位。通常应改初生幼嫩的材料,其分生能力强。根据不同的需要还可取叶片、花、花梗或花梗腋芽、根、茎等
│果实│饨酒精迅速漂洗│2%次氯酸钠浸10│无菌水反复冲洗,│获得无菌苗│
│││││培养│
3、接种培养
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││洗│1%溴水浸5分钟│用无菌水洗5次。│织│
││││组织││
│││││出组织进行培│
│种子│纯酒精中浸10分│10%次氯酸钙浸│九菌水洗3次,在│用幼根或幼芽│
│││分钟│再剖除种子或内部││
││消毒前│消毒│消毒后││
2、消毒
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││沌酒精漂洗│一30分钟││养基上或切取│
组织培养用的材料大多取自田间,带有大量杂菌,这是无菌培养的大障碍,为此,需严治地进行消毒灭菌。取材后先将泥土洗净,再在自来水中冲洗10~2O分钟,然后转入无菌条件(超净台或接种箱内)进行消毒(见表)
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接种的培养材料在消毒滤纸上切成所需大小,通常约几毫米大小,中国兰花茎尖应在0.2毫米以下,为此,需在解剖镜下操作。材料接种后将培养瓶移入培养室,放在培养架上进行培养。工具用完即应在95%洒精中沾一下,然后用火焰消毒法消毒,避免工具带菌造成交叉污染
│││~30分钟│纸吸干│都取出组织来│
│││钠浸15一20分钟││上,或叶片插│
│││││在琼脂中│
│茎切段│自来水洗净,再用│2%次氯酸钠浸15│无菌水洗3次│直立在琼脂培│
│叶片│自来水洗净,吸干,│0.1%氯比汞浸1│无菌水反复冲洗,│选用嫩叶,叶│
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│组织│消毒顺序│备注│
││再用纯酒精漂洗│分钟或2%次氯酸│滤纸吸干│片平放在琼脂│
││钟,再用无菌水漂│20~30分钟,再用│无菌水中发芽。或│来产生愈伤组│
│贮藏器官│自来水洗净│2%次氯酸钠浸20│无菌水洗3次、滤│从消毒材料向│
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